微生物生長以及測量方法
2016-06-06 11:18:07
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我們所說的微生物其實就是指一切肉眼看不到或看不清楚,因而需要借助顯微鏡觀察的微小生物。微生物包括原核微生物(如細菌)、真核微生物(如真菌、藻類和原蟲)和無細胞生物(如病毒)三類。
微生物的基本單位是細胞,在合適的環境條件下細胞會生長,生長是指細胞物質有規律、不可逆增加的過程,主要表現有機體的細胞組分與結構在量方面的增加。也就是說微生物開始大量繁殖的起始,其繁殖定義為:微生物生長到一定階段,由于細胞內各種細胞結構的復制和重建,導致產生一個新的細胞個體,即引起細胞個體數量增加的整個生物學過程。
總而言之,生長是一個逐漸發生的量變的過程,是繁殖的基礎;繁殖是一個質變的過程,是生長的結果。
那么如何測定生長繁殖,我們可以通過以下三個實驗方法可得:個體計數、群體重量測定以及群體生理指標測定。
一、測生長量
測生長量的方法很多, 常見的有下面幾種:
(一)直接法
1、測體積:粗放型,在刻度離心管中測沉降量
2、測干重:精確型,離心法和過濾法獲得菌體細胞
可用離心法或過濾法測定,一般干重為濕重的10%~20%。
(二)間接法
1、比濁法:用分光光度法對無色的微生物懸浮液進行測定,一般選用450~650nm波段。
(三)生理指標法
微生物的生理指標,如氮、碳、DNA、ATP等物質的含量,呼吸強度、耗氧量、酶活性、生物熱等與其群體的規模成正相關。以上指標可以借助儀器測量。
二、計繁殖數
測定繁殖就是要一一計算各個體的數目。
1、直接計數法(全數):指采用計數板,在光線顯微鏡下直接觀察微生物細胞并進行計數的方法。缺點是不能區分死菌與活菌。但可以通過染色后活菌計數可以區分活菌與死菌。
2、間接計數法(活菌數):這是一種依據活菌在液體培養基中會使其變混或在固體培養基上(內)形成菌落的原理而設計。
(傳統法)平板菌落計數法:此法適用于各種好氧菌或厭氧菌。該法相對精確,但對實驗人員要求比較高,否則難以得到正確的結果。
目前市場上出現快速、微型用于菌落計數的測菌片。原理是利用加在培養基中的活菌指示劑TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑),它可使菌落在很微小時就染成容易辨認的玫瑰色。該法簡便,但比較粗放。
通過以上的實驗數據,我們可以了解單位時間里微生物數量或生物量的變化,可以客觀反映微生物生長的規律,從而進一步評價外界培養條件對微生物生長的影響,以及評價不同殺菌劑對微生物產生抑殺作用的效果。
俗話說:知己知彼,百戰不殆。這些數據對我們構建成功的ABP防腐防霉體系具有實際的指導作用。
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